II Jornadas de Inicio a la Investigación de Estudiantes de la Facultad de Biología
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- PublicationOpen AccessEvaluación de la fase circadiana mediante monitorización ambulatoria en humanos: correlación con el dim light melatonin onset(2020-04-14) Rol de Lama, María de los Ángeles; Madrid, Juan Antonio; Bonmatí Carrión, María de los Ángeles; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::FisiologíaRESUMEN Es fundamental desarrollar un sistema que detecte la fase endógena de forma sencilla, ya que las actuales técnicas implican cuantificación de melatonina o monitorización de temperatura central mediante sondas rectales. En este trabajo se validó un sistema de registro ambulatorio. Las variables monitorizadas, durante 10 días en 13 sujetos, fueron temperatura periférica, mediante un sensor en la muñeca; actividad y posición, utilizando un actímetro en el brazo; y luz, mediante un sensor colgado alrededor del cuello. Se obtuvo el marcador de fase estándar dim light melatonin onset (DLMO) en saliva para evaluar la precisión de las demás variables. Además, rellenaron un diario de sueño que evaluó la probabilidad de sueño y los cuestionarios de matutinidad-vespertinidad (Horne-Östberg), de calidad de sueño (Pittsburgh) y de somnolencia (Epworth) para evaluar la preferencia diurna y su influencia en la calidad del sueño. El aumento vespertino de la temperatura periférica se produjo con anterioridad a la elevación de melatonina; el descenso en la actividad, la posición, la variable compuesta TAP, y el aumento en la probabilidad de sueño, con posterioridad al incremento de melatonina. Las puntuaciones de los cuestionarios de matutinidad-vespertinidad y calidad del sueño mostraron alta correlación con el DLMO, confirmando que DLMO tardíos implican mayor vespertinidad y peor calidad del sueño. Este método permite detectar de manera precisa la fase del sistema circadiano sin modificar los hábitos de vida. Los nuevos marcadores de fase propuestos basados en el ritmo de temperatura periférica (WTOn and WTiO) serían adecuados en ámbitos clínicos en los que es fundamental conocer la fase circadiana del sujeto, como en la cronoterapia del cáncer y en la luminoterapia.
- PublicationOpen AccessEstudio de la expresión de VSTM1 en macrófagos humanos y su posible implicación en el desarrollo de cirrosis hepática(2020-04-14) Rodríguez-Alcázar, Juan Francisco; Fernández-Fernández, María Dolores; García-Peñarrubia, Pilar; Martínez-Esparza Alvargonzález, María Concepción; Ruiz Alcaraz, Antonio José; Tapia Abellán, Ana; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Bioquímica y Biología Molecular B e InmunologíaRESUMEN Uno de los objetivos de este trabajo fue el estudio bibliográfico del gen VSTM1, que codifica un receptor inhibidor recientemente descrito en fagocitos. Para ello se revisó la bibliografía publicada en revistas de investigación científica, así como las secuencias depositadas en las principales bases de datos biológicos disponibles en la red hasta el momento. Los resultados encontrados revelaron que la información depositada en las bases de datos por los diferentes autores era redundante y presentaban una nomenclatura diferente. Tras estudios de alineamiento con diferentes herramientas informáticas, pudimos establecer las equivalencias entre los datos publicados. De las 6 isoformas descritas, generadas por maduración alternativa del ARN, sólo algunas secuencias coincidieron en las bases de datos consultadas. Además, se detectó un error en la notación de la secuencia ACU00108, ya que se tradujo en glicina un codón que codifica para serina. El siguiente objetivo fue el estudio de la expresión del gen VSTM1 mediante qRT-PCR en macrófagos peritoneales obtenidos del líquido ascítico de pacientes con cirrosis hepática, y su comparación con los obtenidos para macrófagos de sangre periférica de donantes sanos, como población de referencia. Esta patología se asociada a un incremento de mediadores inflamatorios y podría estar relacionada con la desregulación de algunos de los mecanismos de control del sistema inmunitario. La qRT-PCR realizada con los cebadores diseñados para estudiar las isoformas VSTM1-v1 y v2, reveló que éstas se expresan en ambas poblaciones de macrófagos, siendo mayores los niveles de expresión del transcrito que codifica la isoforma proteíca de membrana (v1) que la secretada (v2). Además, la expresión génica de VSTM1-v1 aumenta con la diferenciación del macrófago. Sin embargo, aunque se aprecia una tendencia hacia una menor expresión en la población de macrófagos de pacientes con cirrosis, estas diferencias no fueron estadísticamente significativas.
- PublicationOpen AccessEstudio de la expresión del receptor LAIR-1 en macrófagos humanos. Posible implicación en el desarrollo de cirrosis hepática(2020-04-14) Fernández-Fernández, María Dolores; Rodríguez-Alcázar, Juan Francisco; García-Peñarrubia, Pilar; Martínez-Esparza Alvargonzález, María Concepción; Ruiz Alcaraz, Antonio José; Tapia Abellán, Ana; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Bioquímica y Biología Molecular B e InmunologíaRESUMEN El primer objetivo de este trabajo fue el estudio bibliográfico del gen LAIR-1, que codifica un receptor inhibidor descrito en fagocitos. Para ello se revisó la bibliografía publicada en revistas de investigación científica, así como las secuencias depositadas en las principales bases de datos biológicos disponibles en la red hasta el momento. Los resultados encontrados revelaron que la información depositada en las bases de datos por los diferentes autores era redundante y presentaba una nomenclatura diferente. Tras estudios de alineamiento con diferentes herramientas informáticas, pudimos establecer las equivalencias entre los datos publicados. De las 4 isoformas descritas, generadas por maduración alternativa del ARN, sólo LAIR-1a y LAIR-1b coincidieron completamente en las bases de datos consultadas. El siguiente objetivo fue el estudio de la expresión del gen LAIR-1 mediante qRT-PCR en macrófagos peritoneales obtenidos del líquido ascítico de pacientes con cirrosis hepática, y su comparación con los obtenidos para macrófagos de sangre periférica de donantes sanos, como población de referencia. Esta patología se asocia a un incremento de mediadores inflamatorios y podría estar relacionada con la desregulación de algunos de los mecanismos de control del sistema inmunitario. La qRT-PCR realizada con los cebadores diseñados para estudiar las isoformas LAIR-1a y -1b, reveló que éstas se expresan en ambas poblaciones de macrófagos. Además, los resultados mostraron que los niveles de expresión para los transcritos que codifican ambas isoformas son menores en la población de macrófagos de pacientes con cirrosis, en comparación con los macrófagos de donantes sanos. Se encontraron además diferencias significativas entre ambas poblaciones de macrófagos en la capacidad de respuesta a estímulos activadores como LPS y C. albicans. Estos resultados podrían contribuir a identificar nuevas dianas terapéuticas o diagnósticas para prevenir el daño hepático.
- PublicationOpen AccessEl patrón de producción de citocinas proinflamatorias en el líquido ascítico de pacientes con cirrosis está relacionado con la etiología viral (VHC) o alcohólica(2020-04-14) Fernández-Fernández, Mª Dolores; Rodríguez-Alcázar, Juan Francisco; Martínez-Pascual, Cristina; Antón, Gonzalo; Miras-López2, Manuel; García-Peñarrubia, Pilar; Martínez-Esparza Alvargonzález, María Concepción; Ruiz Alcaraz, Antonio José; Tapia Abellán, Ana; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Bioquímica y Biología Molecular B e InmunologíaRESUMEN La histiopatología de la cirrosis inducida por alcohol o infección con virus de hepatitis C (VHC) es muy similar, sin embargo el perfil de expresión génica relativa a la respuesta inmunitaria en el hígado, es diferente en función de la etiología de la enfermedad. El objetivo de este trabajo es explorar las diferencias a nivel molecular, analizando el perfil inflamatorio del líquido ascítico y de macrófagos derivados de monocitos peritoneales de pacientes con cirrosis de ambas etiologías. Para ello estudiamos 45 pacientes con cirrosis y ascitis sin infección, distribuidos en función de la etiología de la enfermedad, VHC (n=15) o alcohol (n=30). Las citocinas se analizaron por ELISA en el líquido ascítico o en sobrenadantes de cultivo de macrófagos derivados de monocitos peritoneales aislados y estimulados in vitro con LPS, CpG oligodeoxinucleotidos o con la levadura Candida albicans. El contenido celular de los líquidos ascíticos fue más abundante en la etiología VHC vs alcohol, mientras no encontramos diferencias en el contenido celular en la sangre de estos pacientes. Detectamos niveles más elevados de IL-10 y menores de IL-6 e IL-12 en ascitis del grupo VHC. Los niveles de citocinas referidos al número de macrófagos derivados de monocitos, mostraron además menores niveles para TNF-α e IL-6 en este grupo. Los macrófagos derivados de monocitos aislados mantuvieron su estado in vitro durante al menos 24h de cultivo en presencia o ausencia de estimulación. Existe un patrón diferencial de migración leucocitaria desde la sangre a la cavidad peritoneal dependiendo de la etiología viral o alcohólica. La cirrosis inducida por VHC se asocia con un menor perfil inflamatorio en el líquido ascítico en comparación con la etiología alcohólica. Estos resultados podrían contribuir a identificar potenciales dianas terapéuticas o diagnósticas para enfermedades hepáticas crónicas de diferentes etiologías.
- PublicationOpen AccessCalidad de la grasa de la dieta de un colectivo de estudiantes de la Universidad de Murcia(2020-04-14) Belén-Cutillas, Ana; Pérez-Llamas, Francisca; Zamora, Salvador; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::FisiologíaRESUMEN Los estudiantes universitarios son un grupo poblacional con una alta variabilidad en relación a las tomas realizadas a lo largo del día, tanto en número como en tipo de alimentos. A pesar de ello, no existen muchos estudios centrados en este grupo de población. En este artículo se analiza el perfil calórico y, en detalle, la calidad de la grasa de un colectivo perteneciente a este grupo poblacional, para así determinar si la ingesta se ajusta o no a lo recomendado. Se ha estudiado la ingesta de 223 estudiantes de diferentes carreras impartidas en la Universidad de Murcia, con una edad media de 21,4 ± 2,7 años. La ingesta de energía por parte de ambos sexos es inferior a las recomendaciones. El porcentaje de ésta aportada por lípidos y por proteínas ha sido excesivo, mientras que deficitario el de carbohidratos. En relación al consumo de lípidos, se ha encontrado una ingesta superior a la recomendada de ácidos grasos saturados (AGS) e inferior de ácidos grasos poliinsaturados (AGP) y monoinsaturados (AGM). El consumo de ácido α-linolénico, ácido graso esencial, y de otros ácidos grasos ɷ-3, es inferior de la recomendada, siendo muy bajo el porcentaje de personas que consumen la cantidad recomendada de los dos ácidos grasos esenciales. La comparación con otros estudios pone de manifiesto que los universitarios de la Región de Murcia presentan características muy similares a las del resto de países occidentales, en relación con los hábitos dietéticos.
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