Browsing by Subject "Trichoderma harzianum"

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    Efecto del sustrato y la temperatura en el control biológico de Phytophthora capsici en pimiento (Capsicum annuum L.)
    (Murcia: Universidad de Murcia, Servicio de Publicaciones, 2005) Ezziyyani, Mohammed; Requena, María Emilia; Pérez Sánchez, María Consuelo; Candela Castillo, María Emilia; Biología Vegetal; Facultad de Biología
    El objetivo de este trabajo fue comparar el efecto de la temperatura y el pH sobre la capacidad antagónica in vitro e in vivo del hongo Trichoderma harzianum y las bacterias Burkholderia cepacia y Streptomyces rochei Ziyani, sobre la tristeza causada por Phytophthora capsici. Los ensayos se realizaron en plantas de pimiento, crecidas a partir de semillas tratadas con cada antagonista. En ensayos in vitro se realizaron confrontaciones duales de cada antagonista con el patógeno P. capsici analizando macroscópicamente las interacciones y las capacidades antagónicas a temperaturas de 23 y 30ºC y a distintos valores de pH. Utilizamos una escala de 0 a 4 donde 0 equivale a ninguna invasión de la superficie de la colonia de P. capsici y 4 significa la invasión total de la colonia del patógeno y esporulación sobre la misma. Con esa escala se obtuvo que la capacidad antagónica de los tres antagonistas fue 4. La temperatura óptima de antagonismo fue 30ºC para las bacterias St. Rochei Ziyani y B. cepacia y 25ºC para el hongo T. harzianum. El pH 4,5 no afecta la acción inhibidora de las bacterias, incluso la favorece, y en cambio, a ese pH la colonia de T. harzianum reduce su densidad y color aunque no se afecta su capacidad antagónica. Los trabajos in vivo se realizaron en cámara de cultivo preferentemente a 23ºC porque aunque la agresividad y la velocidad de la necrosis en tallos infectados es mayor a 30ºC, la respuesta defensiva de la planta está favorecida a 23ºC. El efecto del pH en el crecimiento de las plántulas se realizó in vivo en suelos de pHs 5,61, 5,44, 4,95, 4,58, 4.20 y 3.48, obtenidos en mezclas de suelos formados por turba, arena y disolución de KCl 1M, en diferentes proporciones. En el invernadero la intensidad de inhibición varió según el pH del medio de cultivo y los antagonistas. La reducción efectiva de la enfermedad fue de un 3,25 (con el hongo T. harzianum), un 2,10 (con la bacteria B. cepacia) y un 1,85 (con la bacteria St. Rochei Ziyani) lo cual equivale a una reducción porcentual del 37%, 42% y 65% respectivamente. El control se realizó en suelos de pH= 4,58 obtenidos con mezcla de turba en una disolución de KCl 1M, a 25 2ºC. Se usaron distintas concentraciones de las bacterias, pero no se observó diferencias en el grado de reducción de la tristeza. También se estudió la interacción en tallos a nivel estructural mediante microscopía electrónica de transmisión en la interacción C. annuum-P. capsici.
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    Mejora de la capacidad antifúngica in vitro e in vivo de un combinado de antagonistas compatibles frente a Phytophthora capsici Leonian
    (Murcia : Universidad de Murcia, Servicio de Publicaciones, 2011) Ezziyyani, Mohammed; Hamdache, Ahlem; Requena, A.; Egea Gilabert, Catalina; Candela Castillo, María Emilia; González-Ramiro, Laura; Requena, María Emilia
    Se estudió la capacidad antagónica de la combinación de dos microorganismos compatibles entre sí, la bacteria Burkholderia cepacia, y el hongo Trichoderma harzianum sobre el patógeno Phytophthora capsici, agente causal de la podredumbre de pimiento. Se han realizado confrontaciones duales in vitro de los dos antagonistas frente al patógeno y entre ellos, en varios medios de cultivo, temperaturas y pHs. Los antagonistas interfieren en la supervivencia y el desarrollo del patógeno P. capsici. B. cepacia produce antibiosis y T. harzianum ejerce competencia por espacio y nutrientes, micoparasitismo y lisis enzimática. El medio Avena-vermiculita produce un óptimo de biomasa. La dosis óptima de los antagonistas fueron 3.5×108 esporas/ml de T. harzianum y la 109 FCU/ml de B. cepacia, en un rango de pH 3.5-5.6 y temperaturas entre 20-30 °C. In vivo, el tratamiento con la combinación B. cepacia+T. harzianum+ suelo de plantación, ha sido capaz de reducir hasta un 84% la incidencia de la “tristeza” causada por el patógeno P. capsici en plantas de pimiento.
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    Producción de proteínas-PR en la inducción de resistencia a Phytophthora capsici en plantas de pimiento (Capsicum annuum L.) tratadas con Trichoderma harzianum
    (Murcia: Universidad de Murcia, Servicio de Publicaciones, 2005) Ezziyyani, Mohammed; Requena, María Emilia; Candela Castillo, María Emilia; Biología Vegetal; Facultad de Biología
    En este trabajo se evalúa la reacción defensiva que desarrollan las plantas de pimiento, cuando se noculan los tallos con el patógeno Phytophthora capsici y se adiciona a las raíces el hongo antagonista Trichoderma harzianum. Así mismo se comprueba que el tratamiento de las semillas con esporas de T. harzianum incrementa el porcentaje de germinación y el peso seco de las plántulas de pimiento. Las hifas del antagonista colonizan las raíces y la rizosfera de las plántulas crecidas de semillas tratadas, pero el hongo antagonista no alcanza la parte aérea de las plantas de pimiento. La infección de los tallos de pimiento con el patógeno produce una reacción de hipersensibilidad pero la progresión de la necrosis se ralentiza en las plantas tratadas con el antagonista T. arzianum lo que significa una reducción del avance del patógeno mediada por una inducción de resistencia. La adición del antagonista T. harzianum a las plantas de pimiento inoculadas con P. capsici, produce una reacción defensiva con producción de proteínas con actividad peroxidasa. El incremento de actividad afecta tanto a las enzimas constitutivas, como a las que se sintetizan “de novo”, pero el incremento de actividad que se detecta en las plantas control es debido al efecto de la herida y no al tratamiento, pues no progresa a lo largo del tiempo. El tratamiento con T. harzianum en las raíces produce una reacción sistémica en las hojas que se resuelve en producción de proteínas-PR con actividad peroxidasa, a pesar de que las hojas no han sido afectadas por el antagonista ni por el patógeno. Estas peroxidasas-PR son básicas de pI 7,2 y 8,7 y solo se detectan en hojas tratadas con T. harzianum viva y a las 96 horas de inoculación. También se observa incremento de la actividad peroxidasa de las raíces y se detecta la producción de una proteína-PR tanto a las 24 como a las 96 horas. Esta isoenzima es ácida de pI 4,3 y aparece debido al tratamiento con T. harzianum tanto viva como autoclavada, pero no aparece en el control ni en las raíces tratadas con agua-peptona. Esto significa que el elicitor es un componente del micelio del hongo que provoca la reacción defensiva con formación de las peroxidasas. La producción de proteínas-PR con actividad peroxidasa debe formar parte del mecanismo de defensa hipersensible de la planta de pimiento y es el responsable de la inducción de resistencia desarrollada por la planta, después del tratamiento con el hongo antagonista y la infección por el patógeno.
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    Trichoderma harzianum como biofungicida para el biocontrol de Phytophthora capsici en plantas de pimiento (Capsicum annuum L.)
    (Murcia: Universidad de Murcia, Servicio de Publicaciones, 2004) Ezziyyani, Mohammed; Pérez Sánchez, María Consuelo; Sid Ahmed, Ahmed; Requena, María Emilia; Candela Castillo, María Emilia; Biología Vegetal; Facultad de Biología
    En los ensayos de control biológico en pimiento ejercido por Trichoderma harzianum (T.h.) sobre Phytophthora capsici (P.c.), agente causal de la podredumbre de pimiento, se ha optimizado la producción de la biomasa del antagonista T.h. al comparar su desarrollo en tres diferentes medios y soportes de cultivo. El método de producción de la biomasa de T.h. en Agua-Avena-Vermiculita resultó ser el mas rentable por su rápido y abundante crecimiento, viabilidad y bajo coste para utilizarlo como inóculo del suelo, al compararlo con los crecidos en Czapek líquido y PDB. El test del antagonismo in vitro de P.c. frente a T.h. en medio PDA enriquecido con Laminarina-glucosa (3:1, v/v), mostró que T. h. aumenta los niveles de enzimas hidrolíticas B-1,3- glucanasa (lisis enzimática), ejerce una mayor competencia por espacio y nutrientes e interacciona directamente con el patógeno (micoparasitismo), todo lo cual juega un papel importante en la reducción y destrucción de la colonia del patógeno. El filtrado del medio PDB donde se había cultivado T.h. afectó al crecimiento de las radículas de las semillas in vitro. En ensayos in vivo las plantas crecidas a partir de semillas tratadas mostraron un peso seco superior a las testigo. En definitiva, el tratamiento con T.h. ha sido capaz de reducir hasta un 65% la «tristeza» causada por el patógeno P.c. en plantas de pimiento.