Browsing by Subject "qRT-PCR"

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    Estudio de la expresión del receptor LAIR-1 en macrófagos humanos. Posible implicación en el desarrollo de cirrosis hepática
    (2020-04-14) Fernández-Fernández, María Dolores; Rodríguez-Alcázar, Juan Francisco; García-Peñarrubia, Pilar; Martínez-Esparza Alvargonzález, María Concepción; Ruiz Alcaraz, Antonio José; Tapia Abellán, Ana; Facultades, Departamentos, Servicios y Escuelas::Departamentos de la UMU::Bioquímica y Biología Molecular B e Inmunología
    RESUMEN El primer objetivo de este trabajo fue el estudio bibliográfico del gen LAIR-1, que codifica un receptor inhibidor descrito en fagocitos. Para ello se revisó la bibliografía publicada en revistas de investigación científica, así como las secuencias depositadas en las principales bases de datos biológicos disponibles en la red hasta el momento. Los resultados encontrados revelaron que la información depositada en las bases de datos por los diferentes autores era redundante y presentaba una nomenclatura diferente. Tras estudios de alineamiento con diferentes herramientas informáticas, pudimos establecer las equivalencias entre los datos publicados. De las 4 isoformas descritas, generadas por maduración alternativa del ARN, sólo LAIR-1a y LAIR-1b coincidieron completamente en las bases de datos consultadas. El siguiente objetivo fue el estudio de la expresión del gen LAIR-1 mediante qRT-PCR en macrófagos peritoneales obtenidos del líquido ascítico de pacientes con cirrosis hepática, y su comparación con los obtenidos para macrófagos de sangre periférica de donantes sanos, como población de referencia. Esta patología se asocia a un incremento de mediadores inflamatorios y podría estar relacionada con la desregulación de algunos de los mecanismos de control del sistema inmunitario. La qRT-PCR realizada con los cebadores diseñados para estudiar las isoformas LAIR-1a y -1b, reveló que éstas se expresan en ambas poblaciones de macrófagos. Además, los resultados mostraron que los niveles de expresión para los transcritos que codifican ambas isoformas son menores en la población de macrófagos de pacientes con cirrosis, en comparación con los macrófagos de donantes sanos. Se encontraron además diferencias significativas entre ambas poblaciones de macrófagos en la capacidad de respuesta a estímulos activadores como LPS y C. albicans. Estos resultados podrían contribuir a identificar nuevas dianas terapéuticas o diagnósticas para prevenir el daño hepático.
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    Rosmarinic acid inhibits the proliferation of ovarian carcinoma cells by activating the p53/BAX signaling pathway
    (Universidad de Murcia, Histología e Histopatología, 2025) Özdemır İlhan; Doğan Baş Dilek; Öztürk Şamil; Karaosmanoğlu Özge; Cudi Tuncer Mehmet; Biología Celular e Histología
    Objective. While chemotherapeutic agents stop the development of cancer cells, they also kill healthy cells. This study aimed to increase anticancer effects and reduce side effects by combining a phytotherapeutic compound with a chemotherapeutic drug. Methods. This study examined the effects of nine concentrations of rosmarinic acid (RA) and doxorubicin (DOX) on human ovarian adenocarcinoma (OVCAR3) and skin keratinocyte (HaCaT) cell lines. Their cytotoxic effects were assessed based on cell viability, evaluated using the MTT assay, and apoptotic activity, evaluated using NucBlue staining and the gene and protein expression of tumor protein p53 (TP53) and BCL2 associated X, apoptosis regulator (BAX) quantified by qRT-PCR and western blots, respectively. Results. The half-maximal inhibitory concentration after 48 hours was 880.4 μM for RA and 2.26 μM for DOX. The cytotoxicity analysis revealed that cell viability decreased with the RA concentration. RA increased apoptosis in OVCAR3 cells by activating the p53/BAX pathway. Western blots showed that RA and DOX upregulated p53 and BAX protein levels in OVCAR3 cells. Conclusions. The RA and DOX combination inhibited cell proliferation by inducing apoptosis in OVCAR3 cells. These results suggest that RA may reduce the side effects of DOX toxicit