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Alteraciones histológicas debidas al envejecimiento en el túbulo seminífero del hámster sirio (mesocricetus auratus)
(2016-03-02) Horn Ureña, Ramón; Beltrán Frutos, Ester; Pastor García, Luis Miguel; Departamento de Biología Celular e Histología
Un área muy actual de investigación es el estudio de las causas del envejecimiento. En el ámbito de la biología reproductiva también lo está siendo por sus implicaciones tanto en la medicina como en la veterinaria. Si durante muchos años los estudios se han centrado en la mujer o en las hembras para explicar el descenso reproductivo con la edad actualmente se está prestando más atención al factor masculino. Estos estudios abordan varios aspectos: cambios endocrinos, alteraciones de los espermatozoides, trasmisión de enfermedades hereditarias, o la necesidad de terapias sustitutivas de testosterona en la vejez. Respecto a los cambios histológicos del testículo envejecido, se han realizado diversos estudios desde hace décadas, pero han dejado ciertas cuestiones sin aclarar y se han centrado en el hombre y en la rata. Junto a esto, durante los últimos años, diversos autores han propuesto que el mecanismo tisular implicado en la progresiva disminución de la espermatogénesis con la edad, está relacionado con cambios en el equilibrio entre la proliferación/apoptosis en el epitelio seminífero. En la presente tesis doctoral nos hemos propuesto por un lado, realizar un completo análisis histológico tanto cualitativo como cuantitativo de los cambios que acontecen con la edad en el epitelio seminífero y pared tubular del hámster sirio. Por otro, hemos investigado también si la proliferación está o no alterada en este epitelio relacionándola con las alteraciones histológicas observadas en el mismo. Para ello, utilizamos hámsteres machos de 6, 12 y 24 meses de edad. Los testículos fueron fijados y procesados para microscopia de luz convencional e inmunohistoquimica y, electrónica de transmisión. Se realizó un estudio semicuantitativo del tipo histológico de degeneración de las secciones de los túbulos seminíferos determinando el grado de progresiva alteración de su epitelio con la edad. Inmunohistoquímicamente se identificó la inmunoreactividad a laminina y fibronectina en la pared tubular y las células en proliferación. Morfométricamente se calculó una serie de parámetros testiculares y el volumen total de inmunoreactividad a fibronectina y laminina. Respecto a la proliferación se calculó el índice total de proliferación como el número de células proliferando por tipo histológico de sección tubular. Por último, con las secciones ultrafinas se realizó una descripción ultrarestructural del epitelio seminífero y se calculó el grosor de la pared tubular. En los animales envejecidos se observó un incremento significativo de las secciones tubulares con diversas alteraciones del epitelio seminífero especialmente hipoespermatogénesis y detención de la espermatogénesis. El volumen del testículo, el diámetro y volumen del túbulo como el volumen de epitelio del túbulo seminífero sufrieron un descenso significativo con la edad, por el contario la longitud del túbulo se incrementó. El volumen de fibronectina y laminina aumento en los animales viejos siendo el índice de proliferación menor en estos animales. El número de células en proliferación por tipo histológico de sección de túbulo seminífero fue progresivamente y significativamente menor en las secciones alteradas respecto a las secciones normales. No se observó diferencias significativas respecto a la edad entre tipos histológicos de sección de túbulo seminífero. Ultraestructuralmente se observó alteraciones citológicas importantes en la célula de Sertoli así como en el proceso de espermiogénesis. La pared presentó un engrosamiento significativo tanto en los túbulos normales como en los hipoespermatogénicos o en detención de la espermatogénesis. En conclusión, el envejecimiento del túbulo seminífero del hámster supone una pérdida progresiva de la actividad espermatogénica que está relacionada con cambios del túbulo y de su pared. Estos cambios no se producen de forma uniforme en todo él y se asocian a una disminución de la proliferación celular en sus zonas alteradas histológicamente. Éstas presentan además células de Sertoli modificadas ultraestructuralmente. A very current area of research is the study of the causes of aging. In the field of reproductive biology the aging is important by their implications both in medicine and veterinary. If for many years the studies have focused on women or females to explain the reproductive decline with age it is now being paid more attention to male factor. These studies address several aspects: endocrine changes, abnormal sperm, transmission of hereditary diseases, or the need for testosterone replacement therapy in older age. Regarding the histological changes of aging testes, they have conducted several studies for decades, but have left some issues unclear and have focused on humans and rats. Alongside this, in recent years, several authors have proposed that the mechanism involved in decrease of spermatogenesis with age, is related to changes in the balance between proliferation / apoptosis in the seminiferous epithelium. In this thesis we have proposed on the one hand, a complete histological analysis of qualitative and quantitative changes that occur with age in the seminiferous epithelium and tubular wall of the Syrian hamster. Furthermore, we have also investigated whether this proliferation in the epithelium altered is linked with the histological changes observed in it. To do this, we use male hamsters 6, 12 and 24 months old. The testes were fixed and processed for conventional light microscopy, immunohistochemistry and transmission electron microscopy. A semiquantitative histological study of sections of seminiferous tubules for determining the degree of gradual deterioration with age, in its epithelium was performed with age. Immunoreactivity to laminin and fibronectin in the tubular wall and proliferating cells was identified. Morphometrically a series of testicular parameters and the total volume of fibronectin and laminin immunoreactivity was calculated. The total proliferation index as the number of proliferating cells by histologic type of tubular section was calculated. Finally, with ultrathin sections, an ultrarestructural description of seminiferous epithelium, and thickness determination of tubular wall was performed. In aged animals a significant increase in the tubular sections with various disorders especially hypospermatogenesis of seminiferous epithelium and arrest of spermatogenesis was observed. The testicular volume, diameter and volume as epithelial volume of seminiferous tubule suffered a significant decrease with age, on the contrary an increased tubule length was observed. An increase in fibronectin and laminin volume in old animals and less proliferation rate in these animals was determined. The number of proliferating cells per histologic section of seminiferous type tubule, progressively and significantly decrease in altered sections respect to normal sections. No significant differences respect to age between histological types sections of seminiferous tubule was observed. Ultrastructurally important cytological changes were observed in the Sertoli cell and the process of spermiogenesis. The wall thickening showed an increase significant in normal, hipospermatogenic and spermatogenesis arrest tubules. The number of proliferating cells per histologic section of seminiferous type tubule, progressively and significantly decrease in altered sections respect to normal sections. In conclusion, the aging of the seminiferous tubule hamster suppose a loss of spermatogenic activity which is related to changes in the tubule and its wall. These changes do not occur uniformly throughout the tubule and they associated with a decrease in cell proliferation in altered tubular areas. These areas also have Sertoli cells with a modified ultrastructure.
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Análisis de los mecanismos moleculares responsables de la reacción acrosómica en el espermatozoide humano mediados por ZP3 y su implicación en la calidad espermática / María Teresa Zomeño Abellán; directores, Manuel Avilés Sánchez, Miguel Angel Ramírez de Paz.
(Murcia : Universidad de Murcia, Departamento de Biología Celular e Histología,, 2011) Zomeño Abellán, María Teresa
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Antonio Pedro Rodríguez Pérez (1912-1964) : un murciano en la Escuela Neurohistológica Española
(2013-01-16) Rodríguez Ruiz, Purificación; Marset Campos, Pedro; Departamentos y Servicios::Departamentos de la UMU::Ciencias Sociosanitarias
Se estudia en este trabajo la labor científica, docente y cultural de Antonio Pedro Rodríguez Pérez (1912-1964), como uno de los últimos representantes de la Escuela Neurohistológica Española (ENE) continuadora de la obra del Premio Nobel de la Medicina Santiago Ramón y Cajal. En cantidad son 141 trabajos publicados, de los cuales 89 son trabajos de investigación, algunos en colaboración con maestros y compañeros discípulos de Tello. De ellos 46 son morfológicos y 2 morfo-fisiológicos; 39 artículos de revisión fundamentalmente sobre la sinapsis; 14 publicaciones entre libros de texto, educativos, ensayos literarios y biografías de maestros y compañeros. En cualidad son relevantes en histología sus estudios sobre la sinapsis, tanto de las células gliales como de los componentes químicos; sobre los receptores sensitivos de la piel y de los Glomus aórtico y carotídeo; en anatomía patológica los trabajos en colaboración con Gay Prieto, sobre el cultivo del bacilo de Hansen. In this thesis, the scientific, educational and cultural work of Antonio Pedro Rodríguez Pérez (1912-1964) is studied, as one of the last representatives of the Neurohistological Spanish School. That school continued the works of the Medicine Nobel awarded, Santiago Ramón y Cajal. There are 141 published works. 89 of them are research reports, some of which were done with the collaboration of lecturers and classmate disciples of Tello. 46 of them are morphologic and 2 morpho-physiological; 39 were checking reports, mainly about synapse; another 14 are other type of publications, including textbooks, educational books, literary rehearsal and biographies. Synapse reports on glial cells and also on chemical components, on sensory recipients of skin and on aortic and carotid glomus are qualitatively significant, as well as the works about the culture of Hansen bacillus in pathological anatomy.
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Arte y ciencia : consideranciones artísticas sobre los dibujos histológicos de Santiago Ramón y Cajal
(2014-12-01) Meseguer Peñalver, José; Mayor Iborra, José; Facultad de Bellas Artes
La presente tesis se propone como objetivo primordial, el estudio de las relaciones entre arte y ciencia, a través de los dibujos histológicos realizados por Santiago Ramón y Cajal, durante sus estudios sobre la estructura del sistema nervioso del hombre y de los vertebrados. Para ello, primeramente se ha procedido a establecer su perfil personal, científico y artístico. A continuación hemos consultado y analizado información contenida en las fuentes bibliográficas, para establecer una base de conocimiento sobre las relaciones históricas entre el arte y la ciencia, a través del dibujo y de la imagen, como medios de ilustración, que han sido empleados por la ciencia a lo largo de la historia. Además, se pone en consideración la evolución de las técnicas para crear las imágenes objeto de la ilustración científica, los procedimientos de observación de la realidad, para la elaboración de dichas imágenes, así como la evolución acontecida en el proceso creativo de las mismas. Apoyándonos en todo ello como base de conocimiento, hemos procedido a abordar el estudio de los dibujos histológicos sobre el sistema nervioso, realizados por Cajal, con una perspectiva exclusivamente artística. Para llevar a cabo dicho estudio, hemos recurrido tanto a fuentes indirectas, presentes en la literatura, como a visionar los propios dibujos, que se encuentran en el Museo Cajal, del Instituto Cajal, del Consejo Superior de investigaciones científicas de Madrid, como fuente directa de información. A continuación, tomando como base nuestra propia experiencia en el laboratorio de Histología, y utilizando la información técnica impresa, se presenta un conjunto de consideraciones básicas sobre las técnicas de laboratorio realizadas por Cajal y otros científicos coetáneos, responsables de la creación del material microscópico, a partir del cual se realizaron los dibujos objeto de nuestro trabajo. Determinados aspectos de estas técnicas y su relación con las técnicas fotográficas analógicas, nos han permitido establecer consideraciones relativas a las formas, colores o naturaleza de los soportes utilizados para la realización de los dibujos de Cajal. En el apartado de resultados se muestra una selección de dibujos realizados por Santiago Ramón y Cajal. La selección se ha hecho tomando en consideración los diferentes temas científicos a partir de los que fueron realizados los dibujos. El estudio cuidadoso y pormenorizado de estos, nos ha permitido llevar a cabo un conjunto de comentarios relativos a sus características formales (composición, luz, color, temática, etc.), así como sobre al procedimiento artístico creativo y al lenguaje iconográfico de los mismos. De todo ello se concluye que a las reconocidas cualidades científicas de Cajal, se han de sumar unas sorprendentes cualidades para la creación plástica, que desarrolló dentro del rigor de los criterios de objetividad impuestos por la ciencia, en el campo de la observación microscópica. Estos dibujos constituyen verdaderos documentos de gran atractivo pictórico, provistos de una extraordinaria sensibilidad y sentido estético. Cajal realizó estos exquisitos dibujos siguiendo la siguiente secuencia: visualización, observación, análisis, síntesis y representación. Se trata de ilustraciones naturalistas de carácter romántico, provistas de sencillez, delicadeza, espontaneidad, precisión y soltura, que sirvieron de base de partida para la neurociencia moderna. Sin duda, estos dibujos son parte esencial de la obra artística de Santiago Ramón y Cajal, la cual se ve proyectada constantemente hacia el futuro sin perder el nexo con el presente y el pasado próximo. Finalmente, con intención de hacer patente esta proyección y este nexo, como parte y complemento de la presente tesis doctoral, se presenta una instalación de material, que con el título “Imágenes desde la Ciencia” pretende ser una muestra representativa de nuestro recorrido creativo en los campos de la investigación, la docencia y el arte, como parte de la relación arte y ciencia, que es el objetivo de esta tesis doctoral. En ella ofrecemos un conjunto de materiales desarrollados en la Universidad de Murcia como resultado de nuestro trabajo de ilustración científica, al que sumamos material de apoyo docente e investigador y obra pictórica personal. En definitiva, esperamos haber sido capaces de informar adecuadamente sobre la importancia y enorme calidad artística que poseen los dibujos histológicos de Santiago Ramón y Cajal. Estos son, exponente y parte esencial de su capacidad de observación, de estudio, de interpretación y de expresión. Estas cualidades, le sirvieron como medio para el desarrollo de una obra de gran riqueza, tanto para el arte como para la ciencia. La perfecta conjunción y armonía entre arte y ciencia en su obra, como medios para proyectar su afán de conocimiento, le impulsaron a conseguir un lugar de honor entre las figuras más brillantes de nuestra historia y de la historia del mundo. This thesis aims to achieve, as a main objective, the study of the relationships between art and science, through the histological drawings by Santiago Ramón y Cajal, carried out during his studies on the structure of the neuron and nervous tissue of man and the vertebrates. To do this, first of all has been to establish personal, scientific and artistic profile of Cajal. We then consulted and analyzed information on bibliographic sources to establish a base of knowledge about the historical relations between art and science, through drawings and images, as a means of illustration, which has been used by science throughout history. It is in consideration, the evolution of the techniques to create images object of scientific illustration, procedures for observation of reality, for the elaboration of such images, as well as their evolution in the creative process. All this, as a basis of our knowledge, has allowed us to address the study of histological Cajal drawings, with an exclusively artistic perspective. To carry out the study, we have used the literature as an indirect source, and viewing these drawings, which are found in the Cajal Museum, in the Instituto Cajal, of the Consejo Superior de Investigaciones Científicas in Madrid, as a direct source of information. Then, on the basis of our own experience at the laboratory of histology, and using the technical information from the literature, we present some considerations about the basic laboratory techniques performed by Cajal and other scientists peer, responsible for the creation of microscopic materials from which were made the drawings that are the subject of our work. Certain aspects of these techniques and their relationship to the classical photographic methods, have enabled us to establish considerations regarding forms, colours, or features of the supports used for the realization of the histological Cajal drawings. The results section shows a selection of drawings by Santiago Ramón y Cajal. The selection has been done at the light of the different scientific topics from which these drawings were made. The careful and detailed study of the drawings of Cajal has allowed us to carry out a set of commentaries to their formal characteristics (composition, light, colour, topic, etc.), as well as the creative artistic procedure and iconographic language of these drawings. From all this we concluded that the recognised scientific qualities of Cajal, they have add some surprising qualities to plastic creation, developed within the rigour of the objectivity criteria imposed by science in the field of microscopic observation. These drawings are true pictorial appeal documents, provided with an extraordinary sensitivity and aesthetic sense. These exquisite drawings were made by Cajal trough the following sequence: visualization, observation, analysis, synthesis, and representation. They are naturalist illustrations of romantic character, provided of simplicity, sensitivity, spontaneity, precision and ease, which served as the starting point for modern neuroscience. These drawings are an essential part of the artistic work of Santiago Ramón y Cajal, which is projected towards the future without losing the link with the present and near past. Finally, with the aim of follow this projection and this link, as a part and complement of this doctoral thesis, we presents an installation of material, titled “Images from the Science”, which is intended to be a representative sample of our creative work in the fields of the research, the teaching and the art, inside the relation science and art, which is the subject of this thesis. In this installation we offer a set of materials developed at the University of Murcia as a result of our work of scientific illustration, to which we add teaching support material and pictorial personal work. To conclude, we hope to have been able to adequately inform about the importance and artistic quality of the histological drawings by Santiago Ramón y Cajal. These are, without doubt, exponent and an essential part of its observation, study, interpretation and expression abilities. These qualities, served him as a means for the development of a work of great wealth, both art and science. The perfect combination and harmony between art and science in his work, as a means to project their knowledge desire, pushed Cajal to get a place among the most brilliant figures of our history and the history of the world.
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Cambios celulares en el intersticio testicular del hámster (Mesocricetus auratus)durante el envejecimiento y en la regresión tras la exposición a fotoperíodo corto = Cellular changes in the testicular interstitium of hamster (Mesocricetus auratus) during aging and regression after exposure to a short photoperiod
(2013-01-10) Beltrán Frutos, Ester; Ferrer Cazorla, Concepción; Pastor García, Luis Miguel; Facultad de Medicina
El intersticio testicular en hámsters (Mesocricetus auratus) envejecidos y regresados por fotoperiodo corto ha sido caracterizado. Se estudió la proliferación y la apoptosis (TUNEL +) de células intersticiales, la actividad sintética a testosterona, HSP-47 y colágeno IV (α5) de las células de Leydig y la ultraestructura. Se cálculo el volumen total de tejido conjuntivo. El envejecimiento disminuye la proliferación de pericitos. El fotoperiodo corto altera la proliferación y la apoptosis de las células intersticiales y la actividad sintética de las células de Leydig. Disminuye el tejido conjuntivo intersticial. En conclusión el intersticio testicular del hámster envejecido sufre pocas modificaciones. Un menor recambio de las células de Leydig asociado a una muerte constante de ellas, necrosis, puede causar su disminución. Tras el fotoperiodo corto los cambios en las células de Leydig son evidentes, la proliferación de los pericitos es mayor y no hay muerte celular en el intersticio. Palabras clave: testículos, intersticio testicular, célula de Leydig, macrófago, pericito, célula mioide, proliferación, apoptosis, necrosis, tejido conjuntivo, colágeno IV (α5), HSP-47. Testicular interstitium in hamster during aging and after exposure to a short photoperiod were studied. The proliferation and apoptosis of interstitial cells and presence of testosterone, HSP-47 and collagen IV (α5) in the Leydig cells were studied histochemically and semiquantitatively. The total volume of connective tissue and the ultrastructure of the interstitial cells were studied. The aging only diminished the proliferation of pericytes. The regression resulting from short photoperiod altered the proliferation and apoptosis of interstitial cells and the synthetic activity of the Leydig cells. Interstitial connective tissue was also diminished. In conclusion, the hamster testicular interstitium undergoes little modification with aging, although the decrease in the Leydig cell renewal rate and constant cell death –necrosis- may result in their diminution. In contrast, after exposure to a short photoperiod, the changes in Leydig cells are evident and pericyte proliferation is greater, while no cell death is observed in the interstitium. Key words: testes, testicular interstitium, Leydig cells, macrophages, pericytes, myoid cells, proliferation, apoptosis, necrosis, connective tissue, collagen IV (α5), HSP-47.
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Caracterización citoquímica, distribución y modelo de formación de cadenas oligasocarídicas en el acrosoma de rata / José Angel Martínez Menárguez ; José Ballesta Germán, director.
(Murcia : Universidad,, 1994) Ballesta Germán, José Francisco; Martínez Menárguez, José Ángel
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Comportamiento histológico e histomorfométrico de una nueva membrana de colágeno impregnada en melatonina como estimulador en el cierre de defectos óseos : estudio experimental en conejos de Nueva Zelanda / Rocío Requeni Molina; directores, José Luis Calvo Guirado, Francisco Gómez García, José Mate Sánchez de Val.
(Murcia : Universidad de Murcia, Departamento de Dermatología, Estomatología, Radiología y Medicina Física,, 2011) Requeni Molina, Rocío
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Congreso Histología
(2019-11-18) DURÁN, ALFONSO
Este congreso es un foro de encuentro de investigadores españoles, iberoamericanos y de cualquier otra nacionalidad que utilicen la Histología como herramienta de trabajo.
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Estudio clinicopatológico e inmunohistoquímico de tumores testiculares germinales
(2016-01-15) Guzmán Martínez-Valls, Pablo Luis; Martínez Díaz, F.; Campos Aranda, Matilde; Departamento de Oftalmología, Optometría, Otorrinolaringología y Anatomía Patológica
Introducción y Objetivos Los Tumores de Células Germinales (TCG) del testículo representan el 1% de los tumores malignos del varón y es el tipo de cáncer más frecuente entre los 15 y 34 años. Su diagnóstico es de gran importancia ya que dejado a su evolución natural lleva a la muerte al 85% de los enfermos en el curso de 2 a 5 años. Con el tratamiento multimodal la supervivencia ronda el 95% Es imprescindible el estudio histopatológico de los TCG pero es muy recomendable la utilización de técnicas de inmunohistoquímica que nos permita conocer las características antigénicas tumorales que definen clones y subclones de células neoplásicas y nos permiten ayudar a diferenciar los distintos tipos de TCG, su pronóstico y su respuesta al tratamiento. Los Objetivos son: estudiar las características de los TCG y del Tejido Periférico (TP); valorar la expresión de diferentes marcadores inmunohistoquímicos: βHCG, αFP, C-Kit, Ki-67, C-erb-B2, EGFR, AE1/AE3 en TCG y en TP; y por último valorar la correlación entre ambos (TCG y TP). Material y Métodos Se ha realizado un estudio observacional transversal con recogida de todos los tumores testiculares diagnosticados en 15 y 8 años de dos Áreas Sanitarias de la Región de Murcia (España), con un total de 51 especímenes válidos. Se han analizado diferentes variables. Se ha repetido de nuevo el estudio anatomopatológico, realizándose diferentes técnicas inmunohistoquímicas: βHCG, αFP, C-Kit, C-erb-B2, Ki-67, EFGR, AE1/AE3 tanto en el TCG como en el TP. Todo el estudio ha sido hecho por un solo Patólogo Para el estudio estadístico se ha utilizado el paquete SPSS 19.0 y se ha hecho una búsqueda bibliográfica en fuentes primarias y secundarias. Resultados y Discusión Los márgenes en más de la mitad de la Población de TCG son Expansivos. Un tercio presentan Hemorragia intratumoral y más del 59% de esta Población de TCG presentan Necrosis Macroscópica. Más de 2/3 partes de esta Población de TCG son Organoconfinados. El crecimiento más frecuente es el Sólido en Cordones. En Los Tumores con alto índice de proliferación presentan Necrosis en el 85%. Más del 80% presentan Apoptosis. En los Tumores con componente del Seno Endodérmico la presencia de Cuerpos Embrioides es del 53%. Los Cuerpos de Schiller aparecen en un 87 % en los Tumores Mixtos del Seno Endodérmicos o Puros y en ningún Seminoma. Más del 74% de esta Población de TCG presentan Alto Grado. El 83% son PAS+. Los Seminomas Puros expresan βHCG en el 78%. Los Tumores Mixtos sin componente de Saco Vitelino y en Puros no Seminoma ni Seno Endodérmico no se expresan en un 61%. El 73% de los Tumores Mixtos con componente de Saco Vitelino lo presentan. Los TCG que no expresan tampoco lo expresan en el TP y a la inversa que en los TCG que son positivos la expresión también la tienen en el TP. El αFP no se expresa en los Seminomas puros. El 87% de los Tumores Mixtos con Componente de Seno Endodérmico o Puros del Saco Vitelino expresan y pueden contribuir a la identificación éstos y TCG mixtos. En aquellos TCG donde es negativo también lo es en el 72% en el TP. El 89% los Seminomas expresan el marcador el C-kit. El 83% de los Tumores Mixtos sin componentes de Seminoma ni de Coricocarcinoma ni los Puros de esos dos tipos no expresan. En los Tumores Mixtos con Componentes del Seno Endodérmico o Puros del Saco Vitelino el C-kit no se expresa en el 80 %. En los TCG que no expresan C-kit tampoco la expresan en el TP y a la inversa que en los TCG que son positivos la expresión también la tienen en el TP. El Ki-67 se expresa en el 96,1%. Los Tumores Mixtos Seminomatoso o Seminonas Puros o Displasia no expresan C-erb-B2 en un 91%. Los Tumores No Seminomatosos lo hacen en un 39%. El 77% de los Tumores no Teratomatoso no expresan C-erb-B2 y el 66 % de los Teratomas tampoco. En los TCG que no expresan C-erb-B2 tampoco la expresan en el TP y a la inversa que en los TCG que son positivos la expresión también la tienen en el TP. El EFGR en los TCG es negativo en el 72,5%. Los Seminomas no expresan en un 94%. El 78% de los Tumores Mixtos con componente de Seminoma y/o de Coriocarcinoma y éste último Puro expresan EFGR En el 53% de los Teratomas Puros o Mixtos hay positividad a la EFGR. Sin embargo el 83% de los No Teratomas no lo expresan. Si era negativa en TCG lo era en TP. AE1/AE3 en los TCG expresaba positividad en algún grado en el 58,8%. En el 100% de los Tumores Mixtos con Componente del Seno Endodémico o Puro se expresa. Los Tumores Seminomatosos Puros o Mixtos con algún componente de Seminoma o Displasia no presentan positividad en un 83% a AE1/AE3. Los Tumores No Seminomatosos expresan en el 93%. Los Tumores con componente de Teratoma o Puros expresan en un 87%. Un 53% de Los Tumores No Teratomas no expresan este marcador. Cuando en los TCG es negativo también lo es en el TP. . Conclusiones Es imprescindible el uso de un panel de anticuerpos, en estrecha relación con el estudio clinicopatológico, para un correcto diagnóstico y una interpretación adecuada de estos TCG, así como para conocer respuesta al tratamiento y pronóstico del mismo. A tenor de los resultados obtenidos es fundamental la realización de marcadores inmnohistoquímicos y de análisis histológico en el Tejido Periférico al TCG para confirmar la no presencia de Tumor o Lesiones preneoplásicas en dicha zona ante la opción de Cirugía Conservadora. Introduction and Objectives Germ cell tumors (GCT) of the testis account for 1% of male cancers and are the most common type of cancer among young adults between the ages of 15 and 34. Early diagnosis is of great importance, since, if it is left untreated, it can kill up to 85% of patients within 2 to 5 years. With multimodal treatment the survival rate is around 95%. Therefore, it is essential to carry out a histopathological study of GCT. It is also highly recommended to use immunohistochemistry techniques, so that we can identify tumor antigenic characteristics that define clones and subclones of tumor cells and can help us differentiate between the different kinds of GCT, their prognosis and response to treatments. The objectives are to study the characteristics of GCT and Peripheral Tissue (PT) and analyze different immunohistochemistry markers: βHCG, αFP, C-Kit, Ki-67, C-erb-B2, EGFR, AE1 / AE3 in GCT and PT, and evaluate their correlation. Material and methods We performed a cross-sectional study, collecting all testicular tumors cases diagnosed in two different health areas of the Region of Murcia (Spain) over a period of 15 years and 8 years, respectively. Our study covers 51 valid specimens. We analyzed different variables. We performed again a pathological examination, using different immunohistochemistry techniques: βHCG, αFP, C-Kit, C-erb-B2, Ki-67, EGFR, AE1 / AE3 both in GCT and in TP. The pathological examination was done by a single pathologist For the statistical study we used the SPSS 19.0 package and we made a literature search from primary and secondary sources. Results and discussion In more than half the population of GCT tumor margins are Expansive. One third of the patients show Intratumoral Hemorrhage and more than 59% of this population have Macroscopic Necrosis. More than two thirds of this population are Organ Confined GCT. The most common development is the Cord-like Solid one. In tumors with High Proliferation index Necrosis is present in the 85% of cases. More than 80% have Apoptosis. In Yolk Sac the presence of Embryoid Bodies is attested in 53% of cases. Schiller Corps occur in 87% of mixed or pure Yolk Sac tumors and in no Seminoma. Over 74% of this population have high-grade GCT. 83% of them are PAS +. Pure Seminomas express βHCG in 78% of cases. Mixed tumors without Yolk Sac component and nonseminoma nor Yolk Sac pure tumors do not express it in 61% of cases. 73% of mixed tumors with Yolk Sac component present it. In GCTs where βHCG is not expressed, it is not expressed in PT either; and, conversely, in those GCTs where this marker is expressed, it is expressed in PT as well. The αFP is not expressed in pure Seminomas. 87% of mixed tumors with endodermal sinus component or Yolk Sac pure tumors express it and can contribute to the identification and mixed GCT. In those GCT, where it is negative, it is also negative in 72% of PT. 89% of Seminomas show the C-kit marker. 83% of mixed tumors without Seminoma nor Choriocarcinoma components or the pure ones of these two types do not express this marker. In mixed tumors with Yolk Sac components or pure Yolk Sac tumors the C-kit is not expressed in 80% of cases. In GCTs where the C-kit is not expressed, it is not expressed in PT either; and, conversely, in those GCTs where this marker is expressed, it is expressed in PT as well. Ki-67 is expressed in 96.1% of cases. 91% of mixed Seminomatous or pure Seminonas or Dysplasia do not express C-erb-B2. Nonseminomatous tumors express it in 39% of cases. 77% of non Teratomatous tumors do not express C-erb-B2 and 66% of Teratomas either. In GCTs where C-erb-B2 is not expressed, it is not expressed in PT either; and, conversely, in those GCTs where this marker is expressed, it is expressed in PT as well. EGFR is negative in 72.5% of CGT cases. Seminomas do not express it in 94% of cases. 78% of mixed tumors with Seminoma and/or Choriocarcinoma component and pure tumor with Choriocarcinoma express EGFR. In 53% of pure or mixed Teratomas EGFR is positive. However, 83% of Non Teratomas do not express it. If it was negative in GCT, it was in PT as well. AE1/AE3 is positive in 58.8% of GCT cases. In 100% of mixed tumors with Yolk Sac component or pure ones it is expressed. Pure or mixed Seminatomous tumors with a Seminoma or Dysplasia component do not express AE1/AE3 in 83% of cases. In Nonseminomatous tumors this marker is expressed in 93% of cases. Tumors with Teratoma component or pure ones express it in 87% of cases. 53% of Non-teratomas tumors do not express this marker. When it is negative in GCT, it is also negative in PT. . Conclusions It is essential to use a panel of antibodies in close connection with the clinicopathological study for a correct diagnosis and a proper interpretation of these GCT, and to know their response to treatment and their prognosis. In light of the results it is crucial to perform inmnohistochemistry markers and histological analysis of Peripheral Tissue of GCT, in order to confirm the non-presence of tumor or pre-neoplasic lesions in this area with the option of conservative surgery.
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Estudio comparativo del bazo en los diferentes mamiferos domésticos
(Murcia: Universidad de Murcia, Servicio de Publicaciones, 1994) Bautista, María José; Carrasco, L.; Pérez, J.; Chacón M. de Lara, F.; Hervás, J.; Sierra, M. A.; Facultad de Veterinaria
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Estudio estructural y ultraestructural de la "pars distalis" adenohipofisaria de cordero (Ovis aries L.) / Serafín Gómez Cabrera ; directores Antonio Bernabé Salazar, Miguel Angel Gómez Sánchez.
(Murcia : Universidad de Murcia, Facultad de Veterinaria,, 1989) Gómez Cabrera, Serafín
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Estudio estructural y ultraestructural de la "pars distalis" adenohipofisaria de cordero (Ovis aries L.) [Microforma].
(Murcia : Secretariado de Publicaciones, Universidad,, 1993) Gómez Cabrera, Serafín
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Estudio histológico e histomorfométrico de hueso porcino colageneizado (MP3) en defectos óseos críticos : un estudio experimental en conejos de Nueva Zelanda / María del Carmen Mompeán Gambín; directores, José Luis Calvo Guirao, Rafael Arcesio Delgado Ruiz, María Piedad Ramírez Fernández.
(Murcia : Universidad de Murcia, Departamento de Dermatología, Estomatología, Radiología y Medicina Física,, 2011) Mompeán Gambín, María del Carmen
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Estudio histoquímico, inmunocitoquímico y ultraestructural de la mucosa del tracto digestivo de Sparus Auratus L. / Mª Teresa Elbal Leante.
(Murcia : Universidad,, 1984) Elbal Leante, María Teresa
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Estudio inmunocitoquímico ultraestructural de las células productoras de GH y PRL en cabras (capra hircus) en anestro, gestación y producción láctea [Microforma].
(Murcia : Secretariado de Publicaciones, Universidad,, 1993) Sánchez Campillo, Joaquín
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Estudio inmunocitoquímico ultraestructural de las células productoras de PRL y GH en cabras "capra hircus" en anestro, gestación y producción láctea / Joaquín Sánchez Campillo ; director José Antonio Navarro Cámara.
(Murcia : Universidad de Murcia, Facultad de Veterinaria,, 1990) Sánchez Campillo, Joaquín
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Estudio microscópico-óptico y ultraestructural del testículo de Sparus Aurata L. en edades significativas de su ciclo vital / Mª Dolores Gómez Toledo ; directora Blanca Agulleiro Díaz.
(Murcia : Universidad de Murcia, Departamento de Biología Celular,, 1989) Gómez Toledo, María Dolores
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Estudio morfológico de las áreas pigmentadas del oído interno de Mesocricetus auratus / Félix P. García Ortega ; directoras Adelina Zuasti Elizondo, Concepción Ferrer Cazorla.
(Murcia : Universidad de Murcia, Facultad de Medicina, Departamento de Biología Celular,, 1995) García Ortega, Félix P.
Open Access
Heterogeneidad de las células mesenquimales en la membrana amniótica humana en partos a término
(Universidad de Murcia, 2023-12-07) Cortés Sandoval, Salvador; Delgado Marín, Juan Luis; Pastor García, Luis Miguel; Escuela Internacional de Doctorado
Las células mesenquimales (CMa) de la membrana amniótica humana (MAh) presentan características inmunológicas y regenerativas que han suscitado su interés en medicina reparativa. Varias investigaciones han encontrado una cierta heterogeneidad en estas células “in vitro”, sin embargo, no parecen existir caracterizaciones histológicas en la MAh a término "in vivo". Su conocimiento podría encontrar diferencias relacionadas con su viabilidad para el cultivo o su potencial de diferenciación y mejorar la comprensión de los cambios que se producen en las membranas fetales periparto. Los objetivos de la presente tesis son: Experimento 1: 1) Caracterizar las CMa a nivel morfológico con microscopia de luz (ML) y electrónica de transmisión (MET), en busca de características morfofuncionales que muestren su heterogeneidad y diferencias en la actividad sintética, diferenciación o senescencia, 2) estudiar semicuantitativamente la población de CMa para analizar la frecuencia de los posibles tipos celulares en ML y MET, 3) realizar técnicas inmunohistoquímicas (factores de crecimiento, proteínas de matriz extracelular o citoesqueleto), en las CMa, para poder establecer una relación morfo-funcional. Experimento 2: 4) Revisar la estructura histológica en distintas zonas de las membranas fetales con ML, mediante técnicas convencionales de histología, e histoquímicas, específicas de carbohidratos y fibras de colágeno, 5) cuantificar semicuantitativamente los posibles tipos de CMa en las zonas de la MAh. Realizar posteriormente su análisis estadístico para determinar diferencias zonales, en su frecuencia y número total, 6) identificar inmunohistoquímicamente fibronectina y vimentina en las zonas de las membranas fetales, cuantificándolas mediante western blot y correlacionarlas con la distribución de los tipos de CMa. En el primer experimento se procesaron 4 porciones periumbilicales de distintas MAh a término, de partos por cesárea, para ML y MET. Sobre las muestras procesadas para ML se realizaron distintas tinciones histoquímicas e inmunohistoquímicas, llevando a cabo un análisis cualitativo de las CMa. En un segundo experimento se analizaron porciones de la zona periumbilical, intermedia y de ruptura de 10 MAh, de partos eutócicos a término que se procesaron para ML realizando diversas tinciones histoquímicas; y también cuantificación de proteínas mediante western blot. La posible heterogeneidad de las CMa se agrupo según criterios morfológicos. Los resultados mostraron que las CMa presentan una heterogeneidad morfológica encontrado tres tipos celulares (I-III) en ML, distinguiendo, además, las células de Hofbauer en las secciones semifinas. El tipo III mostró el fenotipo más diferenciado y su proporción en la zona de ruptura fue superior a la zona periumbilical. El tipo I, el más indiferenciado, fue más frecuente en esta última (p<0.05). Los tres tipos fueron sucesivamente más intensos a las tinciones de PAS, vimentina, fibronectina, concanavalina-A, VEGF, TGF-β2, PDGF-C y FGF-2. Con MET se identificaron 4 tipos y se observaron dos importantes fenómenos, ambos más intensos en las células tipo 3 y 4: 1) La vesiculación del retículo endoplasmático rugoso (RER) y la exocitosis de su contenido, 2) la dilatación del RER por acumulación de un material, similar a la matriz extracelular, que frecuentemente era liberado. La heterogeneidad de las CMa en las distintas áreas de la MAh guardó relación con la cantidad de fibronectina y vimentina. En conclusión, la población de CMa es heterogénea y específica en cada zona de la MAh. La heterogeneidad parece secundaria a un proceso de diferenciación fibroblástica que finaliza en senescencia, y que está relacionada con un incremento de la síntesis de factores de crecimientos. Junto a ello, existe un estrés del RER caracterizado por dilatación y acumulación en su interior de fibronectina. Estos cambios en las CMa pueden guardar relación con los fenómenos biofísicos asociados al parto y a la ruptura de la MAh, como también podrían ser de interés para futuros trabajos en medicina regenerativa
Open Access
Histología, acitivad proliferativa y apoptótica durante la regresión testicular producida por fotoperiodo corto en el epitelio seminífero del hámster sirio (mesocricetus auratus)
(2015-10-05) Seco Rovira, Vicente; Ferrer Cazorla, Concepción; Pastor García, Luis Miguel; Facultad de Medicina
El hámster sirio (Mesocricetus auratus) es un roedor de reproducción estacional en días largos que sufre una fuerte atrofia testicular cuando es sometido a un fotoperiodo corto. La presente tesis doctoral tiene como objetivos, en primer lugar, estudiar las variaciones histomorfométricas que tienen lugar en el testículo durante la regresión testicular debida a fotoperiodo corto así como determinar la importancia que tienen los fenómenos de proliferación y apoptosis en el proceso de atrofia del epitelio seminífero durante este periodo; en segundo lugar, dilucidar si la histoquímica de lectinas “in situ” permite identificar células germinales y/o somáticas en apoptosis durante esta regresión; finalmente, determinar si existe muerte celular de células de Sertoli durante esta regresión y si se produce por apoptosis. Para ello, se utilizaron 50 hámsteres sirios macho jóvenes sometidos a un fotoperiodo de 14:10h luz-oscuridad. Cinco machos se utilizaron como grupo de control mantenidos con el fotoperiodo de 14:10 h de luz-oscuridad. Los otros animales fueron sometidos a un fotoperiodo corto de 8:16h de luz-oscuridad. A las 4, 6, 8, 10 y 12 semanas se sacrificaron nueve animales tratados más un control, se extrajeron sus testículos y se procesaron para su estudio tanto con microscopía de luz (H&E, histoquímica de lectinas y TUNEL e inmunohistoquímica de PCNA y vimentina) como con microscopía electrónica de transmisión (MET). Mediante microscopía de luz se realizaron diversos estudios semicuantitativos. Con ellos y los del tiempo de sacrificio se establecieron tres grupos de regresión: regresión media (MR), regresión fuerte (SR) y regresión total (TR). Se calcularon también los índices de proliferación y apoptosis de las diferentes células germinales y somáticas del epitelio seminífero. Además, se realizaron estudios cuantitativos utilizando un software de análisis de imagen. Mediante la MET se estudiaron los cambios en las células germinales y de Sertoli durante la apoptosis. Durante la regresión testicular debida a fotoperiodo corto se produjo, a nivel celular en el epitelio seminífero, un descenso inicial de la proliferación en espermatogonias y un aumento de la apoptosis de células germinales. Al final de la regresión, se recuperó la actividad proliferativa de espermatogonias aunque la actividad apoptótica continuó afectando principalmente a los espermatocitos. Histomorfométricamente se produjo tanto un descenso del diámetro y volumen tubular como, un acortamiento del túbulo seminífero con un descenso del volumen intersticial. Varias lectinas mostraron afinidad por residuos de glucoconjugados de células germinales en apoptosis: Gal β1,3-GalNAcα1, α-D-manosa, N-acetilgalactosamina y L-fucosa. Además, la lectina PNA mostró afinidad por células de Sertoli que se encontraban en apoptosis. La H&E y las secciones semifinas identificaron células de Sertoli con una morfología alterada siendo algunas TUNEL+ en los grupos MR y SR. Mediante MET se identificaron cambios característicos de la apoptosis en estas células. Por otra parte, durante la regresión testicular, se observaron, con microscopía de luz, espermátidas elongadas fagocitadas por células de Sertoli mayoritariamente en los grupos MR y SR. En conclusión: a) la regresión testicular en el hámster sirio conlleva, tanto un descenso del diámetro y volumen del túbulo seminífero como el acortamiento del túbulo seminífero y un descenso del volumen intersticial. Además, hay un descenso inicial en la proliferación y un incremento en la apoptosis de las células germinales. Al final de la regresión, las actividades proliferativa y apoptótica de las espermatogónias recuperan los valores anteriores a la regresión; b) el uso de la histoquímica de lectinas podría ser una herramienta muy útil para estudiar la apoptosis en el epitelio seminífero debido a la especificidad mostrada; c) hay evidencias morfológicas de la pérdida de células de Sertoli por apoptosis. También algunas espermátidas elongadas son fagocitadas y eliminadas por estas células de Sertoli. Abstract The Syrian hamster (Mesocricetus auratus) is a long-day seasonal breeding rodent which suffers strong testicular atrophy when subjected to a short photoperiod. The present thesis has as objectives: (i) to study the histomorphometrical changes that take place in the Syrian hamster testes during testicular regression due to a short photoperiod and to determine the importance of the phenomena of proliferation and apoptosis in the process of seminiferous epithelium atrophy during this period; (ii) to determine whether “in situ" lectin histochemistry allows the identification of germ and/or somatic cells in apoptosis during this regression; and iii) to determine whether Sertoli cell death occurs during regression and whether it is produced by apoptosis. For this purpose, 50 young Syrian hamsters subjected to a 14:10 h L:D photoperiod were used. Five males were maintained with this 14:10 h L:D photoperiod and used as Control. The other forty five animals were subjected to a short photoperiod of 8:16 h L:D. At 4, 6, 8, 10 and 12 week, nine treated animals plus one control were sacrificed, and their testes were extracted and processed for study both by light microscopy (H&E, lectin and TUNEL histochemistry techniques and PCNA and vimentin immunohistochemistry) and transmission electron microscopy (TEM). Using light microscopy, several semiquantitative studies were carried out. Based on these data and the week when the animals were sacrificed, three regression groups were established: mild regression (MR), strong regression (SR) and total regression (TR). The proliferation and apoptosis indexes of the different germinal and somatic cells of the seminiferous epithelium were calculated. Furthermore, quantitative studies were made using image analysis software. Using TEM the changes suffered by the different germ and Sertoli cells during apoptosis were studied. During testicular regression due to short photoperiod, an initial decrease in spermatogonia proliferation and an increase in germ cell apoptosis were observed at cellular level in the seminiferous epithelium. At the end of regression, the spermatogonial proliferative activity was recovered although the apoptotic activity continued, mainly affecting spermatocytes. Histomorphometrically, a decrease in tubular diameter and volume, shortening of the seminiferous tubules and a decrease in the interstitial volume were observed. Several lectins showed affinity for glycoconjugate residues (Gal β1,3-GalNAcα1, α-D-mannose, N-acetylgalactosamine and L-fucose) of germ cells in apoptosis. Furthermore, the PNA lectin showed affinity for Sertoli cells undergoing apoptosis. H&E and semi-thin sections identified Sertoli cells with a degenerated morphology that were TUNEL+ in the MR and SR groups. Apoptotic changes in the nucleus and cytoplasm of these cells were identified by TEM. Moreover, during testicular regression and using light microscopy, some elongated spermatids were seen to have been phagocytosed by Sertoli cells, mainly in the MR and SR groups. In conclusion: a) testicular regression in Syrian hamster involves both a decrease in seminiferous tubular diameter and volume, and shortening of the seminiferous tubule accompanied by a decrease in interstitial volume. Furthermore, there is an initial decrease in proliferation and an increase in apoptosis involving all germ cells. At the end of regression, the proliferative and apoptotic activities of the spermatogonia recover the values observed prior to regression; b) lectin histochemistry can be considered a very useful tool for studying apoptosis in the seminiferous epithelium because of the specificity it shows; c) there is morphological evidence that some Sertoli cells are lost through apoptosis. Also, some elongated spermatids are phagocytized and eliminated by Sertoli cells.