Browsing by Subject "Follicles"

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    Effects of frutalin on early follicle morphology, ultrastructure and gene expression in cultured goat ovarian cortical tissue
    (Universidad de Murcia. Departamento de Biología Celular e Histología, 2018) Soares, Maria A.A.; Costa, José J.N.; Vasconcelos, Gisvani L.; Ribeiro, Regislane P.; Souza, José C.; Silva, André L.C.; Van den Hurk, Robert; Silva, José R.V.
    Frutalin is a galactose-binding lectin that has an irreversible cytotoxic effect on HeLa cervical cancer cells, by inducing apoptosis and inhibiting cell proliferation. It was previously shown that after in vitro incubation, frutalin is internalized into HeLa cells nucleus, which indicates that frutalin apoptosis-inducing activity might be linked with its nuclear localization. Considering that drugs commonly used for cancer treatment have a deleterious effect on germ cells, the aim of this study was to evaluate the effect of frutalin on the activation, survival, ultrastructure and gene expression in follicles cultured within ovarian tissue. Goat ovarian fragments were cultured for 6 days in α-MEM+ alone or supplemented with frutalin (1, 10, 50, 100 or 200 µg/ml). Non-culturad and cultured tissues were processed for histological and ultrastructural analysis and they were also stored to evaluate the expression of anti- and pro-apoptotic genes by quantitative polymerase chain reaction (qPCR). The results showed that the frutalin, at all concentrations tested, reduced follicular survival when compared with control medium. Higher concentrations of frutalin (50, 100 or 200 µg/ml) also reduced follicular survival when compared with those tissues cultured with 1 or 10 µg/ml of frutalin. The ultrastructural analysis showed that atretic cultured follicles had retracted oocytes and a large number of vacuoles spread throughout the cytoplasm. In addition, signs of damage of mitochondrial membranes and cristae were observed. Moreover, although a dose-response effect on gene expression has not been observed, when compared with tissues culture in control medium, the presence of frutalin increased in mRNA expression proapoptotic genes. In conclusion, frutalin reduces follicular survival at all concentrations tested, its effects being more pronounced when high concentrations of this lectin (50, 100 and 200 µg/ml) are used. Gene expression profile and ultrastrutural features of cultured follicles suggest that follicular death in goat ovarian tissue cultured in presence of frutalin occurs via necrosis.
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    Rendimiento de OPU en vacas de raza murciano-levantina: respuesta a la estimulación ovárica mediante FSHp (Pluset®)
    (2025-04) Metony, Océane; Heras García, Sonia; Ramal Barea, Ismael; Ruiz López, Salvador; Romero Aguirregomezcorta, Jon; Departamentos; Universidad de Murcia, Servicio de publicaciones.; Facultades,Servicios y Escuelas::Facultades de la UMU::Facultad de Veterinaria
    La técnica OPU (Ovum Pick-Up) permite obtener ovocitos de animales vivos para la fecundación (FIV) y producción in vitro de embriones (PIV). El objetivo del trabajo ha sido evaluar el rendimiento de la OPU en vacas de raza Murciano-Levantina (M-L), con el fin de recuperar ovocitos para la preservación de esta raza en peligro de extinción. Se seleccionaron 2 vacas M-L, Madroña y Unicornio, de 13 y 6 años, respectivamente, que fueron someti-das a un protocolo de estimulación hormonal con FSHp (Pluset®) durante 4 semanas, con un total de 4 sesiones de OPU/animal. Los ovocitos recuperados fueron cuantificados y clasificados en 5 grados (I a IV y degenera-dos) según su calidad ovocitaria. Los ovocitos viables (grados I a III) fueron vitrificados o madurados in vitro para posterior FIV y PIV. Se obtuvieron un total de 108 ovocitos, 34,26% de Madroña y 65,74% de Unicornio, de los cuales 92 (85,18%) fueron viables. El número medio de ovocitos totales (p = 0,03) y viables (p = 0,02) fue superior en Unicornio comparado con Madroña. Se obtuvieron significativamente más ovocitos grados I (p = 0,04) y III (p = 0,03) de Unicornio que de Madroña, y no se encontraron diferencias significativas para ovocitos grado II, IV y degenerados. En Madroña, el mayor número de ovocitos obtenidos fue grado III, con diferencias significativas (p = 0,03) entre este grupo y ovocitos grado I, IV y degenerados. En Unicornio, el mayor número de ovocitos fue grado III, con diferencias significativas (p = 0,02; p = 0,03), entre éste y ovocitos grado IV y degenerados. Este estudio demuestra que la OPU puede aplicarse con éxito en vacas M-L. Los resultados obtenidos muestran que existe variabilidad entre donantes en el número y calidad de ovocitos recuperados. Resultaría conveniente optimizar los protocolos de conservación genética en esta raza.
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    Respuesta a la estimulación ovárica mediante FSH (folltropin®) y rendimiento de opu en vacas adultas obtenidas por diferentes técnicas de reproducción asistida
    (Universidad de Murcia. Servicio de publicaciones, 2022-11-15) Morera Jiménez, Alba; Velasco García, Elena; Ruiz López, Salvador; Romero Aguirregomezcorta, Jon; Anatomía y Anatomía Patológica Comparadas
    Los objetivos de este trabajo han sido realizar un seguimiento ecográfico de los ovarios bovinos para comprobar la respuesta folicular de vacas adultas nacidas por diferentes técnicas de reproducción asistida (TRA), tras aplicar un protocolo de estimulación ovárica con FSH (Folltropin®); y determinar la eficacia reproductiva de los animales estudiados, analizando la cantidad y calidad de los ovocitos obtenidos por aspiración folicular (Ovum Pick-Up, OPU) antes y después del protocolo de estimulación empleado. La experiencia se ha llevado a cabo en las instalaciones del santuario bovino de la Granja Docente Veterinaria de la Universidad de Murcia. Se han utilizado 4 hembras bovinas obtenidas por distintas TRA: inseminación artificial (IA), transferencia de embriones (TE) producidos por TRA con ovocitos cultivados in vitro en medios convencionales y por TE obtenidos por TRA con ovocitos cultivados con fluidos naturales (folicular y oviductal).Los animales fueron estimulados durante 5 semanas mediante un protocolo que consistía en la aplicación de GnRH y posteriormente, FSH (Folltropin®, 350 UI/animal) durante 3 días en dosis decrecientes. Una vez a la semana, al finalizar el protocolo de estimulación ovárica, se realizaba una ecografía de los ovarios y una aspiración folicular ecoguiada (OPU) para comprobar la respuesta al protocolo de estimulación y determinar el número de folículos y de ovocitos obtenidos tras la OPU y su calidad ovocitaria. Previamente al periodo de estimulación con FSH, las vacas fueron ecografiadas y sometidas a OPU 3 semanas sin estimulación ovárica como grupo control.A lo largo del trabajo realizado, se ha comprobado la respuesta al protocolo de estimulación ovárica ensa-yado, y se ha determinado la eficacia reproductiva de los animales, según el número de folículos aspirados y la cantidad y calidad de los ovocitos obtenidos por OPU en cada una de ellas.